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在免疫检测领域，大分子夹心法与小分子竞争法是两种常用的方法。甲功五项中的TSH采用夹心法，而FT3、T3、FT4、T4则采用竞争法，这主要是因为TSH的结果更为稳定。但小分子如何应用夹心法呢？近期的研究为我们提供了新的思路，即利用能够识别抗原抗体复合物的抗体作为检测抗体，从而实现了小分子夹心法的应用。本文以甲状腺素T4为例，探讨了小分子夹心法在提高检测稳定性、缩短检测时间方面的优势。

总甲状腺素（Thyroxine，TT4）即3,5,3’,5’,-四碘甲状腺原氨酸，是由甲状腺滤泡上皮细胞合成并分泌的甲状腺激素。这一激素在生长、分化、发育以及维持代谢平衡方面发挥着至关重要的作用。当甲状腺机能亢进时，合成和分泌的T4增多，导致血清TT4水平上升；而甲状腺机能减退时，无论是原发、继发还是其他原因，TT4水平都会降低。因此，TT4的测定在临床上常被用于评估甲状腺功能。同时，它也是下丘脑-垂体前叶-甲状腺调节系统中不可或缺的组成部分。。TT4的测定在临床上具有广泛的应用，它可用于甲亢、原发性甲减和继发性甲减的诊断，同时也可用于监测TSH抑制治疗的效果。其参考范围为59～54nmol/L（根据Roche试剂说明书）。在单位换算方面，μg/dl等于2.87nmol/L。当TT4水平增高时，这可能意味着患者患有甲亢、急性甲状腺炎、亚急性甲状腺炎、急性肝炎、肥胖症，或是正在使用甲状腺激素，甚至可能摄入了富含甲状腺激素的甲状腺组织。而当TT4水平降低时，则可能提示患者存在甲减、全垂体功能减退症、下丘脑病变或剧烈活动等情况。随着检测技术的不断进步，我们能够更准确地监测和评估患者的甲状腺功能状态。

接下来，我们探讨一下化学发光夹心法与竞争法的区别在化学发光免疫实验中，根据分子大小和待测抗原抗体的差异，会选择不同的反应体系。大分子通常使用夹心法，而小分子则适合采用竞争法。夹心法又分为双抗体夹心法和双抗原夹心法，其中双抗体夹心法在高浓度时可能出现钩状效应，而双抗原夹心法由于生产工艺要求较高，因此不易出现钩状效应。双抗体夹心法（双抗原夹心法类似）的原理是先加入生物素包被的抗体，再加入待测抗原和酶标记的抗体进行37℃孵育反应。经过充分结合后，会形成复合物SA-Bi-Ab-待测抗原-酶标抗体，随后加入底物引发发光。通过定标曲线模型，可以计算出发光光子数量并进一步得出浓度值。夹心法的结果稳定性较好，但在分析时需注意钩状效应可能导致的假阴性结果。

另一方面，竞争法的采用则是在某些特定情况下不可避免的。由于小分子抗原如甲状腺激素的空间限制，一个抗体可能已经完全包裹了抗原，没有额外的空间供第二个抗体结合。因此，在这种情况下，我们选择使用竞争法来进行检测。竞争法的研发、生产难度以及配套仪器的精密要求都相对较高。

竞争法由于受到试剂有限的限制，其灵敏度主要受抗体亲和力影响，因此在痕量检测时，往往难以将阴性样本与阳性样本有效区分。相较之下，夹心法作为一种试剂过量的分析方法，展现出更高的灵敏度、特异性和更广泛的检测范围。特别是第三代T4所采用的小分子夹心法，不仅灵敏度极高，而且测量分析准确，受背景干扰小，检测时间也大大缩短。4.夹心抗体法在发光检测中的应用，实现了从传统的两步竞争法到一步夹心法的飞跃，显著缩短了甲功五项的检测时间，至少压缩了50%。这一创新技术对于甲功联检及POCT快速检测而言，标志着一次重大的技术突破。通过夹心法对TT4进行高效检测，我们成功识别了能够与抗原抗体复合物结合的抗体，作为检测抗体使用，从而大幅提升了试剂的性能，包括灵敏度、精密度和特异性等。这一技术的突破性进展，有力地推动了TT4的精准快速检测，进一步巩固了公司在甲减、甲亢等甲状腺疾病领域的市场领先地位。